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酶底物原理檢測大腸菌群、糞大腸菌群，大腸埃希氏簡介

發(fā)布時間： 2024-04-30　　點擊次數(shù)： 2569次

●GB 4789.28《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制》要求驗證每一批培養(yǎng)基，確保所接收的每批培養(yǎng)基滿足質(zhì)量要求；

●EPA《飲用水檢測實驗室認(rèn)證手冊》第五版(2005年1月)中對質(zhì)量控制的要求：每一批培養(yǎng)基以及實驗室自制的培養(yǎng)基在使用前都應(yīng)該采用陽性和陰性菌株進(jìn)行無菌性檢驗。

產(chǎn)品特點

適用性廣/可靠度高

參照GB/T 5750-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》和 HJ1001-2018《水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法》中酶底物法檢測培養(yǎng)基的要求，環(huán)凱生物自主研發(fā)了酶底物法專用的MMO-MUG培養(yǎng)基，通過100株包含大腸菌群、大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群(包括從水樣分離的菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株)的驗證，結(jié)果顯示培養(yǎng)基特異性高，陽性菌株特征明顯，無假陰性情況。靈敏度高，可精確檢出低至 1MPN/100mL 水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群活菌，而對水樣中常見包括酶底物假陽性菌株在內(nèi)的非大腸菌群抑制明顯。產(chǎn)品通過了生活飲用水、地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水在內(nèi)超200份樣品的測試。

為了滿足客戶的方法驗證、培養(yǎng)基適用性驗證、陽性對照和定量檢測等需求，環(huán)凱生物推出可溯源的質(zhì)控樣。產(chǎn)品結(jié)果顯示底物或熒光底物特異性高，通過抑菌劑抑制其他異養(yǎng)菌，可準(zhǔn)確檢測出水樣中大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞(耐熱)大腸菌群活菌。通過顏色或熒光判讀結(jié)果，陰陽性區(qū)分明顯。

操作簡單/檢驗周期短

只需4步即可完成檢測，平均每分鐘可檢測一份樣品。

檢驗周期只需24小時，無需驗證試驗。

檢測原理

總大腸菌群、糞大腸菌群、大腸埃希氏菌能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，使培養(yǎng)基中的無色底物鄰硝基苯β-D-吡喃半乳甘糖分解黃色的鄰硝基苯酚，其中大腸埃希氏菌還能同時產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶，使培養(yǎng)基中的4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸酶分解為-甲基傘形酮，在紫外燈照射下產(chǎn)生熒光。在36±1℃經(jīng) 培養(yǎng)后培養(yǎng)孔變黃的為總大腸菌群；培養(yǎng)孔變黃并伴有熒光的為大腸埃希氏菌；44.5℃培養(yǎng)后培養(yǎng)孔變黃的為糞大腸菌群，變黃并有熒光的為大腸埃希氏菌。統(tǒng)計陽性反應(yīng)出現(xiàn)的數(shù)量，對照MPN圖表，分別計算出總大腸菌群，糞大腸菌群，大腸埃希氏菌的濃度值。

酶底物法檢測系統(tǒng)(含質(zhì)控樣)技術(shù)參數(shù)

——水中大腸菌群檢測酶底物法產(chǎn)品系列(含質(zhì)控包)技術(shù)參數(shù)

產(chǎn)品

貨號

技術(shù)參數(shù)

Minimal medium

ONPG-MUG

培養(yǎng)基

DW001

●100袋/盒

●封裝包裝

●輻照滅菌

97孔定量盤

DW-DLP-97

●環(huán)氧乙烷滅菌

●97孔定量盤無需稀釋可檢測≤2419

MPN/100mL總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群

51孔定量盤

DW-DLP-51

●環(huán)氧乙烷滅菌

●51孔定量盤無需稀釋可檢測≤200

MPN/100mL總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群

97孔標(biāo)準(zhǔn)陽性比色盤

DW-YXP-97

●裝有黃色及熒光比色物，用于輔助判讀陽性結(jié)果

●環(huán)氧乙烷滅菌

51孔標(biāo)準(zhǔn)陽性比色盤

DW-YXP-51

●裝有黃色及熒光比色物，用于輔助判讀陽性結(jié)果

●環(huán)氧乙烷滅菌

取樣瓶

DW-QYP-10

●20瓶/盒,5盒一箱

●每瓶含10mg 硫代硫酸鈉

●輻照滅菌

水質(zhì)酶底物法

檢測質(zhì)控樣品

QSM006

可溯源的質(zhì)控樣

●含大腸埃希氏菌，肺炎克雷伯氏菌，銅綠假單胞菌

酶底物定量盤程控封口機Elte Sealer-1

778860728

●尺寸420mm長x320 mm寬x360mm 高

●重量約12kg

●封口速度12秒每片

● 預(yù)熱時間<4min

● 通過ISO 認(rèn)證

●帶計數(shù)功能的程控系統(tǒng)

●能連續(xù)封口定量盤，不間斷，提供工作效率

●硅膠托根據(jù)環(huán)凱生物定量盤設(shè)計，使定量盤封口平整

● 噪音<48dB(A)

● 外罩溫度<40℃

●工作電壓AC110V~ 220V

●工作環(huán)境溫度-10℃~ 50℃

酶底物定量盤暗箱式三用紫外分析儀

UV Analyzer-1

778860729

●光源打開方式：手動按鈕

●光源：長壽命LED 光源、365nm 和254nm 波長紫外燈

●材質(zhì)：金屬

●外形尺寸：320×320×260 mm

● 電源：AC220V

●重量：3kg

●工作電壓AC110V~

220V

●工作環(huán)境溫度

10℃~50℃

飲用水檢測

——適用于自來水系統(tǒng)、疾病預(yù)防控制中心、進(jìn)出口檢驗檢疫系統(tǒng)、第三方檢測實驗室

符合GB/T5750-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》酶底物法(MMO-MUG)培養(yǎng)基

步驟1-混合

將MMO-MUG培養(yǎng)基加入到 100mL 水樣中，混合均勻。

步驟2-定量

倒入97孔定量盤，無需稀釋定量范圍：1-200MPN/100 mL 總大腸菌群和大腸埃希氏菌。

步驟3-封口培養(yǎng)

在程控定量封口機上封口后，36±1℃培養(yǎng)24小時。

步驟4-結(jié)果讀取

無色：陰性；

僅變黃：總大腸菌群陽性；

變黃且發(fā)熒光：大腸埃希氏菌陽性；對照MPN 表計數(shù)定量。

質(zhì)量控制體系（質(zhì)控樣）

請在專業(yè)技術(shù)人員指導(dǎo)下完成

意義

● 符合GB27043-2012 合格評定能力驗證的通用要求，符合CNAS-CL01-A001-2022 對微生物實驗室的要求；

● 用于識別培養(yǎng)基、設(shè)備、方法是否準(zhǔn)確及評估操作人員的能力和確認(rèn)其資格；

● 檢測測量方法的有效性。

操作步驟

準(zhǔn)備1個空的無菌瓶(>300 mL) 和300mL 稀釋液(無菌水或無菌PBS 緩沖液)。

將質(zhì)控樣凍干粉從冰箱中取出，置于室溫10~15分鐘平衡溫度。

打開質(zhì)控凍干粉，加入稀釋液3mL溶解凍干粉，待充分溶解后全部轉(zhuǎn)移到無菌瓶中。

加少量的稀釋液沖洗凍干粉瓶，回收所有質(zhì)控樣菌懸液到無菌瓶中，將剩余的稀釋液倒入，充分振蕩確保均勻，總體積為300mL。

每個質(zhì)控樣凍干粉的量可做3個平行實驗，將質(zhì)控樣懸液倒入取樣瓶，每瓶定容到100mL 刻度。

將MMO-MUG 培養(yǎng)基倒入每個含質(zhì)控樣取樣瓶中，混勻。將所有混合液倒入97孔定量盤中并封膜，在36士1C培養(yǎng)24小時。

判讀：黃色孔格為總大腸菌群陽性，黃色且顯熒光為大腸埃希氏菌陽性，對照MPN表定量計數(shù)。

酶底物法檢測配置單一飲用水檢測

產(chǎn)品	貨號	技術(shù)參數(shù)
Minimal medium ONPG-MUG培養(yǎng)基	DW001	100袋/盒
97孔定量盤	DW-DLP-97	用于檢測≤2419MPN/100ML 總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群
51孔定量盤	DW-DLP-51	用于檢測≤200MPN/100ML總大腸菌群和大腸埃希氏菌或糞大腸菌群
97孔定量盤	DW-YXP-97	用于輔助判讀陽性結(jié)果
51孔定量盤	DW-YXP-51	用于輔助判讀陽性結(jié)果
水質(zhì)酶底物法檢測質(zhì)控樣品	QSM006	用于質(zhì)酶底物法檢測質(zhì)控
酶底物定量盤程控封口機 Elte Sealer-1	778860728	配合定量盤使用，用于定量檢測大腸菌群
酶底物定量盤暗箱式三用紫外分析儀UVAnaly zer-1	778860729	用于避免紫外線輻射

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